生物藥表徵研究——單克隆抗體表徵分析方法之一級結構

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單克隆抗體


單克隆抗體(mAbmoAb)是由高度一致的免疫細胞製成的抗體,這些免疫細胞是單一親本細胞的所有克隆。單克隆抗體具有單價親和力,因爲它們結合相同的表位(抗體識別抗原的部位)。幾乎任何物質,都有可能產生特異性結合該物質的單克隆抗體,然後它們可以用來檢測或純化該物質。治療性單克隆抗體通過多種機制發揮作用,例如阻斷靶分子功能、誘導細胞(表達靶標分子的細胞)凋亡或調節信號通路。


1975年Georges Köhler和 César Milstein成功發明雜交瘤技術,奠定了單克隆抗體藥物發展的基礎,並因此獲得1984年諾貝爾獎。



抗體藥物


蛋白藥物包括:酶類藥物、抗體藥物、重組疫苗、融合蛋白,其中抗體藥物是最重要的蛋白藥物;


根據結構,可將單克隆抗體分爲:單克隆抗體(鼠源單抗、嵌合單抗、人源化單抗、全人源單抗)和抗體偶聯藥物、多特異性抗體、抗體融合蛋白、小分子抗體(Fab、ScFv、VHHS)等。



抗體藥物的設計需要根據靶點來進行,目前的熱門靶向包括:PD-1/PD-L1、TNF-α、VEGF、HER-2、CD20、EGFR等。

一個靶點可對應多個藥物,一個藥物可對應多個疾病,所以靶點很重要。


蛋白表徵


蛋白表徵指的是蛋白質的各項特性,包括結構、理化、活性等一系列內容。


鹿明生物單克隆抗體研究方案


鹿明生物可通過LC-MS或LC-MS/MS技術進行分子量、肽譜、N糖譜檢測及單抗從頭測序。


分子量



肽譜


肽譜是一個蛋白經酶解處理後所得最終產物通過色譜分離的指紋圖譜,可爲所分析的蛋白提供一個全面深入的認識。


可確證蛋白多肽的理論序列與修飾及二硫鍵定位情況,抗體類常見修飾爲脫酰胺、氧化、N端環化、C端K缺失、糖化、磷酸化、乙酰化、酰胺化、糖基化等。



N糖譜


N糖譜糖蛋白可以參與免疫防禦、細胞生長以及細胞與細胞間的粘附,而幫助介導這些功能的糖鏈具有無數種複雜的結構。


N糖譜用於單克隆抗體的糖型結構分析,可鑑定糖型種類和相對數量。


單抗從頭測序


單抗從頭測序適用於完全未知序列的樣品,可獲得蛋白的完整一級序列。



圖爲單酶切結果,六酶切可增加肽段覆蓋率及可信度,利用不同酶切肽段之間的互補性實現蛋白分子100%全序列的拼接。


鹿明在單克隆抗體表徵分析上的優勢


鹿明生物,致力於更好的生物質譜檢測技術開發與應用,從組學全覆蓋研究到單分子深入分析,逐步聚焦,只爲實現更好的生物質譜應用;從科技服務到醫藥研究,打通機制研究到臨牀應用的全通路。鹿明生物以生物科技成就他人、造福大衆。



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文章來源於鹿明生物

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