介紹

瑞氏染料是由鹼性染料美藍（ Methvlem blue ）和酸性染料黃色伊紅（ Eostm Y ）合稱伊紅美藍染料即瑞氏（美藍－伊紅Y）染料。
伊紅鈉鹽的有色部分爲陰離子，無色部分爲陽離子，其有色部分爲酸性，故稱伊紅爲酸性染料。美藍通常爲氯鹽是鹼性的，美藍的中間產物結晶爲三氯化鎂複鹽，其有色部分爲陽離子，無色部分爲陰離子，恰與伊紅鈉鹽相反。

染液配製

瑞氏染液配製：
瑞氏染料 830gm 或 1g
甲醇（ AR ） 500ml 或 600ml
先稱乾燥（事先放入溫箱乾燥過夜）瑞氏染料放置乳鉢內，用乳棒輕輕敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯“一面鏡”光澤，而無染料粉粒沉着，再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入一清潔儲存瓶內（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重複數次，直至乳鉢內染料及甲醇用完爲止，搖勻，密封瓶口，存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存 3 個月以上爲佳。
用甲醇作瑞氏染料溶劑，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑，有兩種作用：
1. 甲醇使瑞氏染料中美藍（ M ）與伊紅（ E ）在溶液中離解，可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而着色。在配製的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青，美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色，但不能使胞漿染爲藍色，多餘美藍就可以使胞漿染成藍色，染色主要是化學作用，是離子彼此結合的反應。
2. 甲醇具有強大的脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構的表面積，提高細胞對染料吸收作用，同時由於甲醇吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速染色反應。
緩衝液
緩衝液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察 pH 值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。 緩衝液須保持一定的 pH 使染色穩定， PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ，偏鹼性染料可與緩衝液中酸基起中和作用，偏酸性染料則與緩衝液中的鹼基起中和作用，使 pH 恆定。